cDNA (viết tắt của complementary DNA – DNA bổ sung) là một phân tử DNA mạch đơn được tổng hợp từ khuôn mẫu RNA thông qua quá trình phiên mã ngược. Quá trình này sử dụng enzyme phiên mã ngược để chuyển đổi RNA thành cDNA, tuân theo nguyên tắc bổ sung bazơ nitơ: adenine (A) liên kết với thymine (T) và guanine (G) liên kết với cytosine (C).
Quá trình tổng hợp cDNA:
- Chiết tách RNA: RNA, thường là RNA thông tin (mRNA), được tách chiết từ tế bào hoặc mô.
- Phiên mã ngược: Sử dụng enzyme phiên mã ngược để tổng hợp cDNA từ mRNA.
- Tổng hợp sợi cDNA thứ hai: Sử dụng enzyme DNA polymerase để tạo sợi cDNA bổ sung, hình thành cDNA sợi kép.
Đặc điểm của cDNA:
- Chỉ chứa exon: cDNA được tổng hợp từ mRNA đã loại bỏ các intron, do đó chỉ chứa các đoạn mã hóa (exon). Wikipedia
- Không có intron: Khác với DNA genomic, cDNA không chứa các đoạn intron không mã hóa.
Ứng dụng của cDNA:
- Nghiên cứu biểu hiện gen: cDNA được sử dụng để phân tích mức độ biểu hiện của các gen trong các điều kiện khác nhau.
- Nhân bản gen: cDNA được chèn vào vector để tạo DNA tái tổ hợp, phục vụ cho việc nhân bản và biểu hiện protein.
- Phát triển thuốc: cDNA hỗ trợ trong việc nghiên cứu và phát triển các liệu pháp gen và thuốc điều trị.
Hiểu rõ về cDNA giúp các nhà khoa học nghiên cứu sâu hơn về chức năng gen và ứng dụng trong y học và công nghệ sinh học.