Kỹ thuật cắt mảnh bệnh phẩm chuyển đúc trong parafin
Tóm tắt
Kỹ thuật cắt mảnh bệnh phẩm chuyển đúc trong parafin là bước thiết yếu trong quy trình mô bệnh học nhằm tạo các lát cắt mỏng để soi kính hiển vi. Để đảm bảo quan sát tốt hình thái mô và tế bào, mảnh cắt phải mỏng đều (3–4 µm),...
Nội dung quy trình
Kỹ thuật cắt mảnh bệnh phẩm chuyển đúc trong parafin là bước thiết yếu trong quy trình mô bệnh học nhằm tạo các lát cắt mỏng để soi kính hiển vi. Để đảm bảo quan sát tốt hình thái mô và tế bào, mảnh cắt phải mỏng đều (3–4 µm), không rách, không nhăn và nằm đúng vị trí trên phiến kính.
I. Nguyên tắc
- Cắt mảnh bệnh phẩm có độ dày ≤ 4 µm từ các khối parafin có mô bên trong.
- Sử dụng máy cắt lát mỏng chuyên dụng, kết hợp lưỡi dao sắc và chuẩn hướng.
- Mảnh cắt cần được xử lý ẩm và dàn trải đều trước khi đặt lên phiến kính.
II. Chuẩn bị
1. Nhân sự
02 kỹ thuật viên Giải phẫu bệnh – Tế bào học.
2. Phương tiện và hóa chất
- Máy cắt lát mỏng, lưỡi dao vát 35° hoặc 22°
- Que tãi, phiến kính sạch, bút viết kính
- Bể nước dàn lát cắt (50–60°C)
- Dung dịch albumin (bám mô trên kính)
- Tủ ấm 37°C, bàn hơ
- Găng tay, kính, khẩu trang, áo choàng
3. Bệnh phẩm
Đã cố định, chuyển đúc và vùi trong parafin đúng kỹ thuật.
4. Phiếu xét nghiệm
- Thông tin người bệnh, chẩn đoán, vị trí mô
- Thời điểm lấy mẫu, đúc khối, mã bệnh phẩm
III. Các bước tiến hành
1. Pha dung dịch albumin
- Dự trữ: Lòng trắng trứng : Glycerin (1:1) + thymol
- Dùng ngay: Albumin dự trữ 2ml + nước cất 98ml
- Không để nóng trên 50°C. Dùng ngay trong ngày.
2. Cắt mảnh bệnh phẩm
- Gá khối parafin vào giá kẹp máy cắt, vặn chặt.
- Lắp dao cắt và chỉnh góc nghiêng khoảng 45°.
- Điều chỉnh độ dày lát cắt 3–4 µm.
- Quay vô lăng đều, loại bỏ lát đầu (cắt phá), dùng phần dao giữa để lấy lát cắt chính.
- Thu mảnh cắt đạt chuẩn: không rách, không nhăn, đầy đủ mô.
- Dàn mảnh cắt trong bể nước ấm để làm phẳng, vớt lên phiến kính có phủ albumin.
- Ghi mã số, đặt tiêu bản vào giá, đưa vào tủ ấm 37°C.
IV. Kết quả
- Mảnh cắt mỏng đều, không gấp, không rách
- Vị trí nằm ở 2/3 phiến kính, không lệch
- Parafin còn đủ bao quanh mô, dễ thao tác nhuộm
V. Sai sót và hướng xử trí
Vấn đề | Hướng xử trí |
---|---|
Mảnh cắt dày mỏng không đều | Kiểm tra lại máy cắt, điều chỉnh lưỡi dao và độ cố định |
Mảnh cắt cuộn lại | Giảm độ nghiêng dao, giảm nhiệt phòng, dùng parafin mềm hơn |
Cắt rách, nhiều vết răng | Thay dao mới, làm sạch dao và máy |
Mảnh cắt long khỏi kính | Đúc lại, tăng chất lượng parafin hoặc tăng độ dính albumin |
Điện tích hút mảnh cắt | Hà hơi, làm ẩm nhẹ dao và mảnh cắt |
VI. Bảng tổng kết thiết bị, hóa chất và vật tư tiêu hao
Nhóm | Danh mục |
---|---|
Thiết bị | Máy cắt lát mỏng |
Bể nước 50–60°C | |
Tủ ấm 37°C | |
Bàn hơ/đèn cồn | |
Kính lúp (nếu cần) | |
Hóa chất | Albumin tự pha hoặc albumin bán sẵn |
Nước cất | |
Glycerin, thymol | |
Dung dịch sát khuẩn, ethanol lau dụng cụ | |
Vật tư tiêu hao | Lưỡi dao cắt dùng 1 lần |
Phiến kính sạch | |
Bút ghi kính | |
Găng tay y tế | |
Khẩu trang, kính bảo hộ | |
Áo choàng chuyên dụng |