Dung dịch đệm phosphate (PBS)

Dung dịch đệm phosphate (PBS – Phosphate Buffered Saline) là một dung dịch muối đệm phổ biến, được sử dụng rộng rãi trong các phòng thí nghiệm sinh học, y học, sinh học phân tử và nuôi cấy mô. Đây là một dung dịch đẳng trương và không độc hại với tế bào, giúp duy trì môi trường ổn định về pH (thường ở mức 7.2 – 7.4) và áp suất thẩm thấu tương tự dịch cơ thể. Dung dịch này giúp bảo vệ tế bào khỏi các thay đổi đột ngột về môi trường bên ngoài, từ đó giảm thiểu nguy cơ gây tổn thương tế bào trong các thao tác thí nghiệm.

Dung dịch đệm phosphate (PBS) là gì?

PBS là hỗn hợp dung dịch nước chứa các muối vô cơ như natri chloride (NaCl), kali chloride (KCl), natri phosphate (Na₂HPO₄) và kali dihydrogen phosphate (KH₂PO₄). Với nồng độ và tỷ lệ chuẩn, PBS giúp tạo ra một môi trường đệm có tính ổn định cao về pH và ion, lý tưởng cho các nghiên cứu về sinh học tế bào và phân tử. Dung dịch PBS có thể được bổ sung các chất khác như Ca²⁺ hoặc Mg²⁺ tùy theo yêu cầu cụ thể của từng thí nghiệm.

PBS dùng để làm gì?

• Dùng để rửa tế bào trong quy trình nuôi cấy tế bào, giúp loại bỏ tạp chất mà không làm hại tế bào.
• Đệm dung môi trong các kỹ thuật sinh học phân tử như PCR, Western blot, ELISA.
• Pha loãng kháng thể, enzyme hoặc các loại thuốc thử khác.
• Bảo quản mô, mẫu sinh học trong thời gian ngắn ở nhiệt độ thấp.
• Dùng trong các quy trình tách chiết DNA, RNA, protein giúp giảm nguy cơ phá hủy mẫu.
• Đệm cho các phản ứng hóa sinh nhạy cảm với pH và áp suất thẩm thấu.

Chuẩn bị dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao

• Cân kỹ thuật chính xác tới 0.01 g.
• Bình định mức 1 Lít hoặc 500 ml tùy lượng dung dịch cần pha.
• Ống đong, cốc beaker, đũa thủy tinh hoặc từ khuấy.
• NaCl: 8.0 g
• KCl: 0.2 g
• Na₂HPO₄: 1.44 g
• KH₂PO₄: 0.24 g
• Nước cất hoặc nước khử ion (đảm bảo sạch khuẩn).
• pH meter hoặc giấy quỳ để kiểm tra pH.
• HCl 1M hoặc NaOH 1M (để điều chỉnh pH nếu cần).
• Giấy lọc, chai lưu trữ dung dịch (có thể là lọ thủy tinh hoặc chai nhựa vô trùng).

Tiến hành pha PBS

1. Cân chính xác từng loại hóa chất theo khối lượng đã tính cho thể tích cần pha.
2. Hòa tan muối trong khoảng 800 ml nước cất hoặc nước khử ion trong beaker, khuấy đều cho tan hoàn toàn.
3. Kiểm tra pH dung dịch. Nếu pH lệch khỏi 7.2 – 7.4, điều chỉnh bằng HCl 1M hoặc NaOH 1M.
4. Chuyển dung dịch vào bình định mức và bổ sung nước cất tới vạch 1 Lít.
5. Lọc qua giấy lọc nếu cần và bảo quản trong chai vô trùng ở 4°C. Thời hạn sử dụng thường 1-2 tuần.

Công cụ tính nhanh khối lượng hóa chất

Từ khóa

Dung dịch đệm phosphate, PBS, cách pha PBS, PBS công dụng, PBS chuẩn, PBS trong nuôi cấy, công thức pha PBS, PBS pH 7.4, phosphate buffer saline

Tags

PBS, dung dịch đệm, sinh học phân tử, nuôi cấy tế bào, pha dung dịch, kỹ thuật phòng thí nghiệm, hướng dẫn pha dung dịch, dung dịch đệm phosphate