Dung dịch đệm Tris (Tris-HCl) cách pha

Dung dịch đệm Tris (Tris-HCl) là một loại dung dịch đệm phổ biến được sử dụng rộng rãi trong các nghiên cứu sinh học phân tử, hóa sinh, và y sinh học. Tris là viết tắt của tris(hydroxymethyl)aminomethane, khi phối hợp với HCl sẽ tạo thành một dung dịch đệm có pH ổn định trong khoảng 7.0 đến 9.0, đặc biệt lý tưởng cho các phản ứng enzym và các quá trình sinh học yêu cầu môi trường pH kiềm nhẹ. Dung dịch Tris-HCl giúp duy trì pH không đổi, hạn chế ảnh hưởng của các biến động ion và nhiệt độ trong các thí nghiệm nhạy cảm.

Dung dịch đệm Tris (Tris-HCl) là gì?

Dung dịch đệm Tris (Tris-HCl) là dung dịch có thành phần chính là Tris base (C₄H₁₁NO₃) và acid hydrochloric (HCl). Tris-HCl được điều chỉnh đến pH mong muốn bằng cách thêm HCl vào dung dịch Tris base. Đệm Tris-HCl có ưu điểm nổi bật là ổn định pH tốt trong phạm vi 7.0 – 9.0, ít bị ảnh hưởng bởi nồng độ ion của môi trường, và không tương tác với hầu hết các protein, acid nucleic hay enzyme. Vì vậy, nó được ứng dụng rộng rãi trong nhiều kỹ thuật sinh học phân tử và hóa sinh.

Tris-HCl dùng để làm gì?

• Sử dụng làm đệm trong các phản ứng PCR, điện di DNA/RNA/protein.
• Dùng trong các dung dịch chạy gel agarose hoặc polyacrylamide.
• Đệm cho các phản ứng enzyme, giúp duy trì pH tối ưu cho hoạt tính enzyme.
• Pha dung dịch tách chiết DNA, RNA, protein để ổn định pH.
• Sử dụng trong quá trình tinh sạch protein và các bước rửa trong Western blot, Southern blot.

Chuẩn bị dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao pha dung dịch đệm Tris

• Cân kỹ thuật (chính xác 0.01 g).
• Bình định mức (500 ml, 1000 ml).
• Cốc beaker, đũa thủy tinh, ống đong.
• Tris base (C₄H₁₁NO₃): thông thường khoảng 12.1 g cho 1 L dung dịch 0.1 M.
• HCl đậm đặc (khoảng 37%) hoặc HCl 1M.
• Nước cất hoặc nước khử ion.
• pH meter hoặc giấy quỳ kiểm tra pH.
• Chai bảo quản dung dịch (lọ thủy tinh hoặc nhựa vô trùng).

Tiến hành pha chế Tris-HCl

1. Cân chính xác lượng Tris base cần thiết (ví dụ 12.1 g cho 1 L dung dịch 0.1 M).
2. Hòa tan Tris base trong khoảng 800 ml nước cất, khuấy đều cho tan hoàn toàn.
3. Đo pH dung dịch bằng pH meter.
4. Thêm từ từ HCl đậm đặc hoặc HCl 1M để điều chỉnh pH đến giá trị mong muốn (thường pH 7.4 hoặc 8.0).
5. Chuyển dung dịch vào bình định mức và bổ sung nước cất vừa đủ 1 L.
6. Bảo quản dung dịch trong chai vô trùng ở nhiệt độ phòng hoặc 4°C, tùy yêu cầu sử dụng.

Công cụ tính nhanh khối lượng Tris base

Từ khóa

Dung dịch đệm Tris, Tris-HCl, Tris buffer, cách pha Tris-HCl, dung dịch đệm sinh học, Tris-HCl pH 7.4, Tris-HCl pH 8.0, hướng dẫn pha Tris-HCl, Tris trong PCR, Tris buffer preparation

Tags

Tris-HCl, dung dịch đệm, sinh học phân tử, điện di, PCR, pha dung dịch, kỹ thuật phòng thí nghiệm, hóa sinh